原位雜交第二天
1.
1）將探針回收，放于－20C保存(通常探針可重復使用十次左右)。
2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分鐘，重復一次。
3）置換2XSSCT1ml，60℃，放置15分鐘。
4）置換0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分鐘，重復一次。
2.
1）用MABT洗兩次，每次五分鐘，放在搖床輕輕搖動。
2）室溫下加1ml 1：2：7溶液，時間為一小時。
3）按1：3000的比例在1：2：7溶液中加入酶連，4C 冰箱過夜。
原位雜交是一種生物學技術，它可以在細胞或組織中特定部位檢測DNA或RNA的存在，而不需要將DNA或RNA分離出來。這項技術使用標記的DNA或RNA探針，與細胞或組織中的相應DNA或RNA進行特異性結合，然后通過光學顯微鏡或電子顯微鏡觀察探針的位置和數量。
原位雜交的原理很簡單。DNA或RNA分子具有互補的核苷酸序列，因此可以通過氫鍵相互結合。將標記的DNA或RNA探針與細胞中的DNA或RNA進行雜交，可以特異性地檢測這些探針的位置和數量。探針的數量和位置可以反映DNA或RNA在細胞中的水平和分布。
原位雜交技術可以應用于以下場景：
組織中病毒DNA/RNA的檢測和定位。例如，可以用于檢測EB病毒mRNA、人類狀瘤病毒和巨細胞病毒DNA等。
癌基因、抑癌基因及其他各種功能基因在轉錄水平的表達及其變化的檢測。
檢測染色體的變化，如染色體數量異常和染色體易位等。
在植物基因組研究中的應用。例如，通過與特定基因序列的探針進行雜交，可以在植物染色體上定位到目標基因的位置，進而構建遺傳圖譜，為植物育種和基因組研究提供基礎數據。
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